На настоящий момент в связи с ростом заболеваемости проблема выявляемости туберкулеза в стране приобретает особое значение Однако, зачастую, при использовании методов подкожного и внутрикожного введения туберкулина результаты реакции осложняются аллергическими проявлениями на компоненты раствора туберкулина. В этих случаях возникает необходимость дополнительного обследования пациентов для исключения возможности действительного инфицирования пациента Mycobacterium tuberculosis. Учитывая, что очищенный туберкулин в стандартном разведении (туберкулезный аллерген для внутрикожного применения) является очищенным фильтратом убитой нагреванием культуры микобактерий туберкулеза человека, иммунологическая реактивность на него протекает по типу гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) с участием Т-лимфоцитарного звена системы иммунитета. Практика лабораторной диагностики предлагает для этой цели метод торможения миграции лимфоцитов, который в силу своих особенностей не отличается высокой точностью, воспроизводимостью и чувствительностью. Внедрение новых современных технологий (гибридомной технологии, проточной лазерной иммуноцитофлюориметрии -ПЦМ-метод) и аппаратуры нового поколения в широкую лабораторную практику позволяет унифицировать ранее ручные иммунологические методы, снизить погрешность при выполнении исследования. Целью нашей работы является использование ПЦМ-метода для обследования пациентов с положительными или сомнительными результатами реакции на внутри- или подкожное введениe туберкулина.
Материал и методы
Обследовали 118 пациентов в возрасте от 1 до 15 лет, направленных в лабораторию СДЦ с положительными или сомнительными результатами реакции на внутри- или подкожное введение туберкулина. У 41 пациента (группа 1) повышенную сенсибилизацию к туберкулину (2туб.ед. с твином, «Биопрепарат», Санкт-Петербург ) определяли с использованием модифицированного метода Уанье (Федосеев Г.Б. с соавт., 1995г.), у 57 пациентов (группа 2) — с использованием реакции лейкоцитолиза с микроскопическим учетом результатов (Ногаллер А.П., 1985г.) , у 20 пациентов (группа 3) повышенную сенсибилизацию к туберкулину определяли с применением разработанного нами ПЦМ-метода с использованием проточного лазерного цитометра EPICS XL («Coulter», USA) и МКАТ ИКО-46 к поверхностному общелейкоцитарному антигену СD 45 («МедБиоСпектр», Москва) в режиме лимфогейта по отработанным ранее параметрам (Васнева Ж.П.,Торопова Н.Е., 1995г.). В качестве контроля для группы 1 использовали бланк пробу, в которой сыворотку инкубировали с физ.раствором вместо туберкулина. В качестве контрольной для группы 2 и 3 использовали пробы, где кровь инкубировали с физ. раствором вместо туберкулина. Определение коэффициента сенсибилизации (К) в группе 1 проводили по формуле